工程菌種篩選是中試研究生產(chǎn)工藝的上游部分，菌種的優(yōu)劣對(duì)于規(guī)模化生產(chǎn)起決定性作用，因此篩選出高質(zhì)量的菌種是生物制藥流程上的關(guān)鍵一環(huán)。本公司經(jīng)過(guò)多年研究，總結(jié)出菌落挑選原則，建立了單克隆篩選的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，確保挑選出的單克隆基因穩(wěn)定、表達(dá)重現(xiàn)性好、目的蛋白可溶性好、收率高。
重組蛋白生產(chǎn)用菌種采用原始種子批、主種子批和工作種子批三級(jí)種子批管理，該管理有利于實(shí)現(xiàn)目標(biāo)蛋白的持續(xù)穩(wěn)定表達(dá),本公司以質(zhì)粒丟失率、傳代穩(wěn)定性確定種子批優(yōu)劣，從而確保發(fā)酵生產(chǎn)工藝穩(wěn)定、可控、均一。
發(fā)酵工藝的優(yōu)化是提高目標(biāo)蛋白表達(dá)量的有效手段。本公司通過(guò)對(duì)微生物不同生長(zhǎng)階段、 pH值、碳氮源、補(bǔ)料方式、升溫程序的優(yōu)化，開(kāi)發(fā)出成熟的發(fā)酵工藝。并采用原核高效表達(dá)載體phoA、pcold，對(duì)于含有稀有密碼子或含有多個(gè)半胱氨酸難于表達(dá)的蛋白，均實(shí)現(xiàn)了高效和可溶性表達(dá)。
